
Доставка
Возврата
Поддержка
- Самовывоз - бесплатно;
- Отправка до Транпортной компании - бесплатно;
(Деловые линии, ЖелДорЭкспедиция, ПЭК, Nord Will, СДЭК)
Доставка до порога (без учета погрузо-разгрузочных работ) по Москве и МО (не более 15км от МКАД):
- при заказе от 20 000 руб - бесплатно;
- при заказе от 10 000 руб - от +1 500 руб;
Подробнее о доставке.
Bst ДНК полимераза, является рекомбинантным белком – большим фрагментом ДНК полимеразы Bacillus stearothermophilus. Фермент содержит гистидиновую метки на С-конце и имеет молекулярную массу 68,9 кДа. Фермент является высокопроцессивным, катализирует синтез ДНК в направлении 5’-3’ и обладает высокой вытесняющей активностью . Bst ДНК полимераза не обладает 5'-3' и 3'-5' экзонуклеазной активностью.
Оптимальную активность фермент проявляет при 65 °С и рН 8,9.
Область применения:
- Петлевая изотермическая амплификация (LAMP)
- Полногеномное секвенирование
Источник
Bst ДНК полимераза выделена из штамма E.coli, содержащего плазмиду с клонированным полноразмерным геном большого фрагмента ДНК-полимеразы I Bacillus stearothermophilus.
Единицы активности:
Одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию ДНК за 30 мин при 65°С.
Контроль качества.
Каждая партия фермента тестируется на отсутствие эндонуклеазной и неспецифической экзонуклеазной активности, чувствительность фермента.
Концентрация фермента: 10 ед.а./мкл.
Буфер хранения:
10 мМ Трис-HCl, рН 7.1, 50 мМ KCl, 1 мМ DTT, 0.1 мМ EDTA, 0.1% Triton X-100, 50% глицерин.
10х LAMP буфер (Кат №: SP030, поставляется отдельно): 300 мМ Tris-HCl (pH 8.9), 50 mM (NH4)2SO4, 0.5 мг/мл БСА, 2.0% Tween 20.
Типичный протокол LAMP:
Состав реакционной смеси:
Компонент | Финальная концентрация | Количество, μl |
10× LAMP буфер (Кат №: SP030) | 1 × | 5 |
100 mМ MgSO4 | 4-10 mМ (6 mM)* | 3* |
10 mM dNTP Mix (Кат №: NM10) | 1.4 mM каждого | 7 |
16 μM FIP/BIP Primers | 1.6 μM | 5 |
2 μM F3/B3 Primers | 0.2 μM | 5 |
8 μM LoopF/B Primers | 0.8 μM | 5 |
10 U/μl Bst ДНК полимераза | 0.008 – 0.2 10 U/μl (0.033 U/μl)* | 0.2* |
ДНК-матрица | > 10 копий на реакцию | переменный |
Стерильная вода (Кат №: SP010) | До 50 | |
Общий объем реакционной смеси | 50 μl |
* рекомендуемая концентрация
Для проведения амплификации можно использовать как специализированные амплификаторы для изотермической амплификации так и амплификаторы для проведения ПЦР. Амплификацию реакомендуется проводить в интервале температур 60 – 65 °С в течении 20-30 минут. Для корректной интерпретации результатов рекомендуется всегда ставить контроль без матрицы.
Условия хранения
Хранить при -20°С – 1 год; не более 30 циклов замораживания-размораживания.
Условия транспортировки
Транспортируется в термоконтейнерах с охлаждающими элементами, допускается повышение температуры до температуры окружающей среды при транспортировке до 10 дней.
Вы смотрели
Комментарии ()