НСЕ ИФА Набор реагентов для иммуноферментного определения нейронспецифической енолазы в сыворотке (плазме) крови

Набор реагентов «HCE-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации нейронспецифической енолазы в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа. НСЕ (нейронспецифическая енолаза) – цитоплазматический гликолитический фермент, присутствующий в клетках нейроэктодермального происхождения, нейронах головного мозга и периферической нервной системы. Нормальное содержание НСЕ в сыворотке крови людей не превышает 13 нг/мл. Количественное определение НСЕ в сыворотке или плазме крови, особенно одновременно о определением карциноэмбрионального антигена (КЭА) (XEMA кат. № К224) и CYRFA21-1 (XEMA кат. № К236), используется используется в целях контроля течения и терапии мелкоклеточного рака лёгкого и нейробластомы. Повышение уровня НСЕ в сыворотке крови отмечается при лейкозах, раке почек, после лучевой и рентгенотерапии; у больных с доброкачественными заболеваниями легких, а также при почечной недостаточности, доброкачественных заболеваниях печени, приеме муко- и бронхолитиков, курении. При заборе крови необходимо учитывать, что фермент содержится в эритроцитах и тромбоцитах, следовательно, гемолиз значительно завышает результаты анализа. Не допускается длительное хранение цельной крови так как при этом уровень NSE неспецифически повышаются; центрифугирование необходимо проводить не позднее, чем через 1 час после взятия пробы. Определение нейронспецифической енолазы основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к НСЕ человека. В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание НСЕ, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе. Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к НСЕ человека с пероксидазойхрена. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации нейронспецифической енолазы в исследуемом образце. Концентрацию нейронспецифической енолазы в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания нейронспецифической енолазы в калибровочных пробах.