св [бета]-ХГ ИФА Набор реагентов для иммуноферментного определения свободной бета-цепи хорионического гонадотропина в сыворотке (плазме) крови

Набор реагентов «свβХГ-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации свободной β субъединицы ХГ в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа. Хорионический гормон (ХГ) – гликопротеин, вырабатываемый плацентой во время беременности. ХГ появляется в сыворотке крови и моче начиная с 7-13 дня после оплодотворения яйцеклетки. Интактная молекула ХГ состоит из двух нековалентно связанных полипептидных цепей – α- и β-субъединиц. Измерение интактного ХГ и его α-цепи ХГ дает сходные результаты в крови и моче; в то же время данные измерения концентрации β-цепи значительно отличаются. Во время беременности уровни интактного ХГ и его свободной β-цепи (свβ-ХГ) достигают своего максимума на 8–9 неделе, а потом постепенно снижаются. Во втором триместре беременности в сыворотке крови уровень интактного ХГ вариирует в пределах от 20 до 50 МЕд/мл (примерное соотношение
1 нг = 15 мМЕд); концентрации СВОБОДНЫХ α- и β- цепей составляют не более 0.5-1% от содержания интактного ХГЧ в течение всей беременности. Во время беременности уровни интактного ХГ и свβ-ХГ достигают своего максимума на 8–9 неделе, а потом постепенно снижаются. Недавно показано, что при трисомии 21 хромосомы наблюдается значительное увеличение концентрации
свβ-ХГ по сравнению с контролем. В сочетании с определением других маркеров (АФП, ПАББ-А) определение свβ-ХГ может использоваться для оценки риска развития врожденных аномалий плода. В онкологии определение интактного ХГ и свободных субъединиц не является полезным маркером нетрофобластических опухолей, однако абсолютное увеличение концентрации свβ-ХГ может указывать на рост хориокарциномы в отличие от нормальной беременности.Определение свободной β субъединицы ХГ основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к свободной β субъединице ХГ человека. В лунках планшета, при
добавлении исследуемого образца, происходит связывание свβХГ, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе. Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител β субъединице ХГ человека с пероксидазой хрена. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации свободной β субъединицы ХГ в исследуемом образце. Концентрацию свободной β субъединицы ХГ в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания свободной β субъединицы ХГ в калибровочных пробах.