Стабилизатор РНК 100 мл

Реагент предназначен для обеспечения сохранности РНК в тканях и клетках. После сбора образцы (фрагменты тканей или осадок клеток) сразу помещаются в стабилизатор РНК, реагент проникает в ткани и клетки, обеспечивая целостность РНК. Образцы хранятся в стабилизаторе РНК не менее 1 суток при 37°C, не менее 1 недели при 15-25°C, не менее 1 месяца при 2-8 °C, не менее 1 года при -20°C без заметного снижения качества РНК.

На приведённых данных гель-электрофореза (см. ниже) изображены образцы РНК, выделенные из тканей мыши, хранившихся в стабилизаторе РНК при 37 °C (3 суток), 25 °C (2 недели), 4 °C (1.5 месяца), -20 °C (1 год), -50 °C (1 год).

1 – сердце, 2 – почки, 3 – печень.

Меры предосторожности

При работе необходимо соблюдать правила общей и личной техники безопасности. Токсичен при попадании на кожу и внутрь. При попадании на кожу промойте немедленно большим количеством воды. При необходимости покажитесь врачу.

Протокол

- Ткани

1. Разрезать образец свежей, незамороженной ткани на мелкие фрагменты, толщиной не более 0.5 см.
   Примечание: образцы большего размера пропитываются реагентом слишком медленно, поэтому внутри РНК может деградировать. Небольшие органы, например, почки мышей можно хранить в реагенте целиком.
2. Добавить к образцу не менее 10 объёмов стабилизатора РНК. Реагент должен полностью покрывать образец.
   Примечание: рекомендуется взвесить образец перед добавлением стабилизатора. К 1 мг ткани нужно добавить не менее 10 мкл стабилизатора. Увеличение объёма стабилизатора не ухудшает сохранность РНК.
3. Инкубировать образец при 2-8 °C 1 сутки, если планируется хранить образец при температуре -20 °C и ниже. Если планируется хранить образец при 2 °C и выше, то сразу поместить образец в нужные условия.
4. Для длительного хранения рекомендуется поместить образцы на – 20 °C или - 70 °C.
   Примечание: при – 20 °C образцы могут не замёрзнуть. Хранение при низких температурах приводит к образованию кристаллов или осадка, которые не влияют на выделение РНК.

- Клетки

1. Осадить клетки центрифугированием по протоколу, применяемому в вашей лаборатории.
   Примечание: для лучшей сохранности РНК не промывать клетки.
2. Добавить к образцу не менее 10 объёмов стабилизатора РНК.
3. Инкубировать образец при 2-8 °C 1 сутки, если планируется хранить образец при температуре -20 °C и ниже. Если планируется хранить образец при 2 °C и выше, то сразу поместить образец в нужные условия.
4. Для длительного хранения рекомендуется поместить образцы на – 20°C или - 70°C.
   Примечание: при -20°C образцы могут не замёрзнуть. Хранение при низких температурах приводит к образованию кристаллов или осадка, которые не влияют на выделение РНК.

Выделение РНК из образцов, хранившихся в стабилизаторе РНК

Выделение РНК из тканей животных или растений рекомендуется проводить реагентом «Лира» (LR-100, LR-200, LRP-100-2, LRP-100-3, LRU-100-50), из тканей растений Набором R-Plants (R-Plants-10, R-Plants-50, R-Plants-250). Замороженные ткани разморозить при 15-25°C, затем переместить ткани стерильным пинцетом в чистую пробирку. Дальнейшее выделение проводить по протоколу, указанному в описании реагента.

Выделение РНК из клеток рекомендуется проводить реагентом «Лира» (LR-100, LR-200, LRP-100-2, LRP-100-3, LRU-100-50) или набором для выделения РНК (RUplus-10, RUplus-50, RUplus-250). К образцу добавить 4 объёма реагента «Лира», водного буфера для лизиса или другого лизирующего раствора. Дальнейшее выделение проводить по протоколу, указанному в описании реагента.

Дополнительные реагенты:

• Реагент «ЛИРА»/Набор «ЛИРА+» для выделения РНК, ДНК и белков (Кат. № LR-100, LR-200, LRP-100-2, LRP-100-3)
• Набор для выделения суммарной РНК и микроРНК из реагента «Лира» (клетки, ткани) (Кат. № LRU-100-50)
• Набор для выделения РНК на колонках (модифицированный) (Кат. № RUplus-10, RUplus-50, RUplus-250)
• Набор R-Plants для выделения РНК из растений (Кат. № R-Plants-10, R-Plants-50, R-Plants-250)
• Стерильные пестики для гомогенизации образцов тканей в микропробирках (Кат. № pest-10).
• Буферы для электрофореза в агарозном геле: трис-ацетатный буфер (Кат. № BE-DNA-500, BE-DNA-1000), трис-боратный буфер (Кат. № TBE-500).
• Раствор бромистого этидия (Кат. № EtBr-10) для визуализации НК.
• Буферы для внесения образцов ДНК и РНК в гель (Кат. № D-3001, D-3002, D-3003).
• Термолабильная ДНКаза, 2 ед/мкл (Кат. № EM-100, EM-250, EM-1250).

Условия хранения:

Стабилизатор РНК хранить при температуре от +2 до +8 °C. Срок годности см. на упаковке. При хранении возможно образование осадка, в таком случае необходимо, инкубировать реагент при 30-50°C, периодически перемешивая, до полного растворения осадка.

Условия транспортировки:

Транспортировку реагента производить при температуре от +15 до +25 °C.

Допускается транспортирование при температуре не выше +25°C в течение 14 суток.