• Напишите нам
  • mail@snablab.ru
+7(495)660-35-58 Перезвоните мне
Пн. - Чт.: с 9.00 до 18.00
Пт.: с 9.00 до 17.00

БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) 400 реакций

Наличие товара: Под заказ
Бесплатная
Доставка
Гарантия
Возврата
Онлайн
Поддержка
i
  • Самовывоз - бесплатно;
  • Отправка до Транпортной компании - бесплатно;
    (Деловые линии, ЖелДорЭкспедиция, ПЭК, Nord Will, СДЭК)

Доставка до порога (без учета погрузо-разгрузочных работ) по Москве и МО (не более 15км от МКАД):

  • при заказе от 20 000 руб - бесплатно;
  • при заказе от 10 000 руб - от +1 500 руб;

Подробнее о доставке.

Цена по запросу

Набор БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) предназначен для синтеза первой цепи кДНК при проведении двухэтапной количественной ОТ-ПЦР. В набор входит готовая смесь БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×), включающая: термостабильную ревертазу RNAscribe и ингибитор РНКаз для защиты РНК-матрицы от разрушения, а также все необходимые для проведения обратной транскрипции реагенты.

Максимальная представленность всех последовательностей РНК в виде кДНК обеспечивается присутствием случайного гексапраймера и oligo(dT)16 праймеров в оптимальном соотношении. Кроме того, реагент содержит инертный синий краситель для визуального контроля при постановке реакции. Объем исходного материала для проведения реакции может варьировать от единичных копий РНК до 1 мкг без потери качества обратной транскрипции.

БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) может проводить синтез кДНК в температурном интервале 42 – 65°С. Для большинства приложений оптимальной является температура 55°С. Формат набора позволяет значительно сократить время на первую стадию в двухстадийной ОТ-ПЦР.

В состав набора входит Контроль-ОТ (5×), который представляет собой смесь реагентов полностью идентичную по составу смеси БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×), но БЕЗ фермента.

Состав набора

Компонент Каталожный номер (количество реакций по 20 мкл)
R02-100 R02-400
БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) 1 × 400 мкл 2 × 800 мкл
Контроль-ОТ (5×) 1 × 40 мкл 1 × 160 мкл
Вода, обработанная ДЭПК 1 × 1,8 мл 4 × 1,8 мл

Состав БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×):

100 мM Трис-НCl, рН 8.3 (при 25 °C), 250 мM KCl, 2,5 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата, 20 мМ MgCl2, 2,5 мМ TCEP, стабилизаторы и усилители фермента, обратная транскриптаза RNAscribe RT, ингибитор РНКаз, инертный краситель, случайный гексапраймер и oligo(dT)16 праймер.

Применение

  • Синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени;
  • Синтез кДНК для клонирования;
  • Синтез кДНК сложных и длинных матриц;
  • Получение меченых кДНК зондов для микрочипов (microarray);

Свойства реакционной смеси

  • Эффективная работа в широком диапазоне температур (42 – 65°С)
  • Стабильность при хранении (до одного месяца при + 4°С);
  • Эффективное покрытие (оптимальное соотношение неспецифических праймеров).

Преимущества использования

  • Смесь окрашена для облегчения раскапывания;
  • Высокая чувствительность (10 пг – 1 мкг РНК);
  • Простота и удобство в использовании;
  • Низкая ошибка пипетирования;
  • Позволяет стандартизовать условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах);

Протокол

Рекомендуем перед началом работ ознакомиться с правилами и рекомендациями, приведенными в описании к набору на сайте http://biolabmix.ru

Общие рекомендации

БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) может проводить синтез кДНК в температурном интервале 42 – 65°С. Для большинства приложений оптимальной является температура 55°С.

Мы рекомендуем использовать 1 мкл реакционной смеси в качестве матрицы для последующей ПЦР. При необходимости, можно использовать в качестве матрицы до 25% от объема ПЦР-смеси неразведенной кДНК. Для удобства работы, можно развести полученную кДНК после реакции в 5 раз (до 100 мкл) безнуклеазной водой и брать в последующую ПЦР по 5 мкл.

Обратная транскрипция (синтез первой цепи кДНК)

  1. Аккуратно перемешайте реакционную смесь БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) и сбросьте капли.
  2. Замешайте реакционную смесь для получения первичной цепи кДНК, как описано ниже:
Компонент На одну реакцию (20 мкл) Конечная концентрация
БиоМастер RNAscribe RT Plus (5×) 4 мкл
Образец РНК переменный до 1 мкг
Вода, обработанная ДЭПК До 20 мкл  

Инкубируйте в амплификаторе по следующему протоколу:

Шаг Температура, °С Время, мин
Отжиг праймеров 25 2
Синтез кДНК 55 10*
Инактивация 95 1

*указано время для получения коротких фрагментов с последующим анализом с помощью ПЦР в режиме реального времени. Если планируется анализировать более длинные фрагменты, рекомендуем увеличить время до 30-50 мин.

Условия хранения:

Хранить при температуре -20°С – 1 год; не более 30 циклов замораживанияразмораживания.

Фермент устойчив к инкубации при комнатной температуре (до 7 дней).

Условия транспортировки

Транспортировать в термоконтейнерах с охлаждающими элементами.

Допускается повышение температуры до температуры окружающей среды при транспортировке до 7 дней.

Вы смотрели