Набор miRNeasy Mini Kit предназначен для выделения тотальной РНК, включая микроРНК, из 1 x 10⁷ клеток и 50 мг тканей (100 мг адипозных тканей).
- Эффективное выделение тотальной РНК, включая микроРНК (≥ 18 нуклеотидов).
- Фенол-хлороформ-гуанидинтиоцианатный лизис в комбинации с очисткой РНК на колонках ссиликагелевой мембраной.
- Протокол для одновременного выделения тотальной РНК нуклеотидов и микро РНК (≥ 18 нуклеотидов) или в двух разных фракциях.
Набор miRNeasy Mini Kit сочетает в себе фенол-хлороформ-гуанидинтиоцианатный лизис и очистку тотальной РНК на колонках с силикагелевой мембраной. Реагент QIAzol Lysis Reagent, входящий в набор, представляет собой монофазный раствор фенола и гуанидина тиоцианата, который позволяет лизировать самые сложные образцы тканей, при этом ингибируя РНКазы. После к смеси добавляют хлороформ, и она разделяется на три фазы: РНК переходит в водную фазу, ДНК в интерфазу, а белки – в органическую.
После разделения лизата на три фазы, водную часть с РНК отделяют, добавляют этанол для создания оптимальных условий для связывания РНК, включая микроРНК, на колонке с силикагелевой мембраной. Мембрана затем промывается, после чего РНК, включая микроРНК, элюируется с колонки. Объем элюции – 30 мкл.
Если необходимо разделить большие молекулы РНК (>200 нуклеотидов) и микроРНК на две фракции, необходим дополнительный набор RNeasy MinElute Cleanup Kit. Набор также предлагается в формате miRNeasy Micro – для образцов малого объема (например, биоптатов после лазерной микродиссекции).
Комментарии (0)