Набор miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit предназначен для выделения тотальной РНК, включая микроРНК, из сыворотки и плазмы крови на колонках с силикагелевой мембраной без этапа органического лизиса.
Работа набора miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit может быть полностью автоматизирована на станции QIAcube Connect.
- Без этапа органического лизиса фенол-хлороформ-гуанидинтиоцианатом.
- Колонки MinElute для обеспечения минимальных объемов элюции - до 20 мкл.
- Эффективное удаление ингибиторов.
Для контроля эффективности выделения РНК рекомендуем воспользоваться синтетическими спайк-ин контролями, например miRCURY RNA Spike-In Kit, for RT.
Выделение микроРНК с помощью набора miRNeasy Serum / Plasma Advanced Kit состоит из нескольких стадий: лизиса буфером на основе гуанидинтиоцианата, удаления ингибиторов при помощи запатентованной технологии и дальнейшую очистку микроРНК на колонках с силикагелевой мембраной. Буфер RPL для лизиса содержит гуанидинтиоцианат, а также детергенты для облегчения лизиса и денатурирования белковых комплексов и РНКаз. Буфер RPL добавляется к образцам сыворотки или плазмы. После тщательного перемешивания добавляется буфер RPP для осаждения белков. Супернатант, содержащий РНК, переносят в новую микроцентрифужную пробирку и добавляют изопропанол, чтобы обеспечить соответствующие условия связывания для всех молекул РНК, начиная примерно с 18 нуклеотидов на колонке с силикагелевой мембраной, после чего РНК на колонке промывают и элюируют.
Так как в сыворотке и плазме присутствуют, в основном, малые РНК, включая микроРНК, дополнительное обогащение фракции малых РНК не требуется.
Комментарии (0)