Набор RNeasy PowerSoil DNA Elution Kit предназначен для селективной элюции ДНК микроорганизмов при использовании совместно с набором RNeasy PowerSoil Total RNA Kit для выделения РНК микроорганизмов из почвы.
- Высокий выход РНК из образов почвы весом до 2 г.
- Выделение из любых типов почв, в том числе компоста, навоза и других типов почв с высоким содержанием органических веществ.
- Время выделения – 2,5 часа.
- Эффективное удаление ингибиторов.
Набор позволяет последовательно удалять гуминовые вещества, фульвокислоты и другие ингибиторы ОТ-ПЦР при выделении РНК из почвы. В набор входит LifeGuard Soil Preservation Solution — специально разработанный раствор для сбора и транспортировки образцов почвы для последующего выделения РНК. Раствор сохраняет жизнеспособность бактерий в почве, удерживая их в бактериостазе. Также раствор ингибирует активность РНКаз и ДНКаз, что, как следствие, обеспечивает точный синтез полноразмерной кДНК и профилирование 16S рРНК в образцах, собранных в полевых условиях. Образцы, стабилизированные раствором LifeGuard Soil Preservation Solution, могу храниться до 30 дней при -20°C, 1 неделю при 4°C и 3 дня при комнатной температуре. Не рекомендуется использовать растворы RNALater и RNAProtect для стабилизации РНК в образцах почвы.
Принцип работы набора
Образцы весом до 2 г гомогенизируются в 15 мл пробирках, содержащих шарики из карбида кремния, буфер для лизиса, фенол / хлороформ / изоамиловый спирт (pH 6,5–8) и раствор IRS для удаления ингибиторов. Такой состав обеспечивает полный лизис всех микроорганизмов в пробе и нейтрализацию РНКаз. Затем лизаты осаждаются для концентрирования нуклеиновых кислот, и осадок ресуспендируется в буфере, оптимизированном для дальнейшего связывания РНК на колонке с анионообменной смолой. РНК элюируют высокосолевым буфером и обессоливают переосаждением.
Для селективного выделения ДНК из образцов почвы используется альтернативный высокосолевой буфер, входящий в набор RNeasy PowerSoil DNA Elution Kit.
Комментарии (0)